Noverse澳洲源胎牛血清開學(xué)*

胎牛血清Noverse1500A適用骨髓間充質(zhì)干細胞 適合用于常規(guī)細胞原代細胞以及干細胞的培養(yǎng) 內(nèi)毒素含量極低 <3EU/ml(規(guī)定：特級胎牛血清<10 EU/ml) 極利于細胞的生長和傳代 ，適合各種細胞培養(yǎng) 七次無菌過濾，zui后三次為0.1 µm無菌過濾處理 進行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測，符合動物協(xié)會要求 胎牛血清Noverse1500A適用骨髓間充質(zhì)干細胞 間充質(zhì)干細胞是特征明確的一類成人干細胞。它們有發(fā)育為成熟細胞的潛在能力而產(chǎn)生脂肪、軟骨、骨骼和肌肉。這些特性與它們發(fā)育中的可塑性共同作用，使人們對用間充質(zhì)干細胞來替換受損組織的潛在能力產(chǎn)生了極大的興趣。間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)，在轉(zhuǎn)化生長因子作用下會分化成軟骨細胞。相反，在有血清、抗壞血酸和地塞米松的作用下會分化成成骨細胞。間充質(zhì)干細胞有能力更新和分化成多種間充質(zhì)組織。間充質(zhì)干細胞有潛能被移植到受損傷的部位或者種植到仿生支架上，生長形成適當(dāng)?shù)慕M織結(jié)構(gòu)。 　

如何避免血清中產(chǎn)生沉淀? 按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：

(1)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

(2) 血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。

(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。

(4) 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。

(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

(6) 若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎? 一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。 為什么要熱滅活血清? 加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué) 研究，培養(yǎng)ES細胞、平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。 有必要做熱滅活嗎? 實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物 的分裂擴增。 若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間，更確保血清的質(zhì)量! 細胞培養(yǎng) 中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理? 一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。 如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：

(1)細胞生長過老，破碎的細胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長;

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;

(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。

細胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成?

(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。

(3) 培養(yǎng)基保持PH值7.0- 7.2。

(4) 嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。

(5) 掌握細胞傳代的時機，細胞切勿生長過老。

牛血清是細胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。

1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。

2. 提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。

4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。

5.起酸堿度緩沖液作用。

6.提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。

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