HO8910人卵巢癌細胞
細胞規格:1.2*10∧5
細胞形態: 細胞株
生長特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
培養條件:DMEM+10%/胎牛血清,37℃,5%CO2
凍存條件:常規培養基,20%FBS,10%DMSO
傳代方法:細胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶,加培養基混勻分瓶,T25瓶中加培養基至6-8ml,T75瓶加培養基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養。
郵購備注: 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若有懸浮的細胞,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清,剛接到細胞時血清濃度可以在15%。
HO8910人卵巢癌細胞
貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細胞當天盡快更換新鮮*培養基,第二天再進行消化處理
2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態,請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養觀察。同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基,培養觀察
3.若出現生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養基進行培養
貼壁細胞常規培養傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的*培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養
4.注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項作或者凍存