HKF人瘢痕疙瘩成纖維細胞
細胞生長:貼壁生長
細胞形態:上皮樣;多角形
細胞傳代:1:2~1:4傳代;每周2~3次
細胞純度:92%上細胞神經元細胞標記物為陽性
細胞凍存:液氮凍存(基礎培養基+5%DMSO+20%FBS)
細胞活力:代取材活力≥90
產品復蘇率≥60培養兩天就能清晰看到軸突與樹突,培養時間可長達13-16天。
質量控制:本產品經過了細菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測。
培養操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態*的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
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